Ozonul elimina noul virus Sars-Cov-2 in mostre de mucoasa

Jurnalul “New Microbes and New Infections”, Volume 43 Number C 2021

Articol publicat online:  24 July 2021

Autori:

F. Sallustio G. Cardinale, S. Voccola, A. Picerno, P. Porcaro si   L. Gesualdo

Investigațiile recente au arătat că sindromul respirator acut sever coronavirus 2 (saS-CoV-2) este capabil să reziste pe suprafețe și că difuzarea apare prin picături care pot rămâne suspendate în aer ca aerosoli.

Ozonul generat in situ din oxigen este un ingredient activ cu o acțiune „biocidă”, dar se știe foarte puțin despre capacitatea sa de a inactiva în mod specific s-CoV-SARS-2.

Aici arătăm, pentru prima dată, eficiența tratamentului cu ozon pentru a neutraliza SARS CoV-2 prezente în probele de secreție nazofaringe cu încărcătură virală ridicată.
Datele noastre arată că ozonul este eficient în eliminarea SARSS-CoV-2.

La începutul lunii ianuarie 2020, un nou coronavirus a fost identificat ca agent infecțios responsabil de apariția unei pneumonii virale la Wuhan, China S-CoV-2 SARS este răspândit prin transmitere de la om la om: Prin picături respiratorii, prin secrețiile salivă și aerosol ale căilor respiratorii superioare, efectuate prin tuse și/sau strănut [2]; contact direct, cu o strângere de mână și atingând membranele mucoase ale gurii, nasului și ochilor cu mâinile contaminate; transmisie fecal-orală 

Deși se stabilește că intrarea în aerosoli poate avea loc nu numai prin căile respiratorii, ci și prin membranele mucoase conjunctivale și orale, nu este clar dacă o persoană poate fi infectată chiar și prin atingerea suprafețelor sau obiectelor contaminate de virus și apoi atingerea gurii sale, nas și ochi.

Odată expulzat din organism, virusul, dacă este conținut într-un aerosol, poate rămâne suspendat pentru o perioadă care poate varia în funcție de dimensiunea lichidului sau a particulelor solide la care poate fi atașat. Atunci când este depusă pe diferite tipuri de suprafețe, are o activitate variabilă în funcție de materialul pe care îl întâlnește, dar durata virulenței sale este încă în studiu .

Din aceste motive, este important să se stabilească o metodă validă de igienizare a locului de muncă și a camerelor de zi. Ozonul generat- in situ din oxigen este un ingredient activ cu acțiune „biocidă” ca dezinfectant pentru suprafețe și apă potabilă și utilizat în turnurile de răcire ale instalațiilor industriale. Ozonul are o eficacitate micro-bicidală și asupra virușilor 

Ozonul (O3) este instabil deoarece gazul se degradează rapid în starea sa stabilă, oxigenul diatomic (O2) odată cu formarea atomilor de oxigen liber sau a radicalilor liberi. Atomii de oxigen liber sau radicalii sunt foarte reactive, și se oxidează aproape toate (inclusiv virusul, bacteriile, compuși organici și anorganici) în contacte, ceea ce face ozon un dezinfectant puternic și oxidant.

Literatura de specialitate a arătat că, în unele studii clinice, terapia cu ozon a fost administrat pacienților cu COVID-19, iar aceste studii au arătat că această terapie a dat beneficii pacienților, ca reducerea hipoxiei țesutului, scăderea hipercoagulabilității, protecție renală și cardiacă, modularea funcției imune, îmbunătățirea
funcția fagocitară și replicarea virală afectează
Studiile au arătat că expunerea la ozon a eliminat SARSS-CoV-2 inactivat termic în diferite componente ale echipamentului individual de protecție (PPE) în condiții de expunere adecvate, în concentrații de ozon, Și condițiile de umiditate relativă, reducerea riscului de contaminare asociat cu gestionarea echipamentului individual de protecție și creșterea disponibilității acestuia [19]cu toate acestea, se știe puțin despre capacitatea ozonului de a inactiva în mod specific SARSS-CoV-2. Aici arătăm că ozonul poate inac- tiva SARS-CoV- 2 prezente în secrețiile nazofaringelui.

Materiale și metode

Tampoanele nazofaringiene au fost colectate în duplicat de la cei 25 subiecți. Am colectat, cu același tampon, atât secțiunile nazofaringe, cât și din peretele posterior faringian și stâlpii amigdale.
Studiul a fost realizat în conformitate cu Declarația de la Helsinki și cu Orientările europene pentru bune practici clinice, iar toți subiecții au obținut consimțământul scris.

Prezența sau absența SARS-CoV-2 a fost detectată de kitul în timp real SARS-COV-2 (SARS-COV-2) în timp real AA1571/96, nuclear laser Medicine s.r.l., Settala, Milano, Italia) utilizând CFX, Biorad în timp real, înainte și după tratarea PCR cu ozon. Specificitatea și sensibilitatea kitului utilizat în timp real este de 100%, iar limita de detecție a s- SARS-COV-2 in timp real este 3,28 cp/reacție. Toate experimentele au fost realizate în urma recomandărilor producătorului kitului în timp real SARS-COV-2.

Primerii care țintesc cadrul de citire deschis 1ab (ORF1ab), proteina E și proteina nucleocapsid (N) au fost amplificați și examinați, după cum se indică în kitul de detectare. Controlul intern endogen (RNază P) a fost extras și amplificat în comun pentru a monitoriza toate procedurile. Pentru fiecare pacient, au fost colectate două tampoane. Pentru tratamentul cu ozon, una dintre cele două tampoane a fost plasată într-un tub sub o hotă cu flux laminar (model de top sigur, Eurocone S.p.A., S.p.A.) și a fost expusă la ozon generat de aparatul Bio3gen (Finlinea s.p.a., Gazzaniga, Bergamo, Italia) Cu un debit de 3.6 l/min și o putere de ozon de 400 mg/h pentru un timp total de 4 minute. SARS-COV-2 ARN-ul a fost extras de tamponul NLM AA1571/96 SARS-COV-2
Kitul de extracție rapidă ARN (nuclear laser Medicine s.r.l., Settala, Milano, Italia) din produse tratate cu ozon și din tampoane netratate, au fost colectate urmând instrucțiunile producătorului, dizolvându-le într-un tub care conține 300 ul de soluție de extracție a ARN-ului. Probele au fost analizate de kitul de detecție în timp real SARS-COV-2 după cum s-a descris în prealabil.

Rezultate și discuții

Ozonul poate neutraliza SARS-COV-2
PCR-ul în timp real pe eșantioane înainte de tratamentul cu ozon a arătat că probele noastre au fost toate pozitive pentru SARS-COV-2. Atât cadrul de citire deschis 1ab (ORF1ab) și proteina E și genele proteinei nucleocapsid (N) au fost amplificate pozitiv. Majoritatea probelor au avut valori CT cuprinse între 16 și 22, arătând că încărcătura virală a mostrelor noastre a fost foarte mare.

În schimb, după tratamentul cu ozon, toate cele 25 probe au dat un rezultat negativ pentru virus, de asemenea, probe cu o încărcătură virală ridicată și nici o amplificare genică pentru niciuna dintre cele trei gene SARS-COV-2 nu a fost detectabilă). Aceste rezultate au arătat, pentru prima dată, eficiența unui tratament cu ozon pentru a neutraliza SARS-COV-2. Difuzia sa apare prin micro-picături (picături) lui Flügge și este capabil să rămână suspendat în aer ca un aerosol (picături de bază). Picăturile de flügge cu un diametru >5 microni se pot întinde până la 1m distanță . Nucleele picăturilor de Flügge (nucleele picăturilor) cu un diametru < 5 microni determină un aerosol care are o capacitate de difuzie mai mare de 1 m [20].
Ozonul este capabil să degradeze rapid compușii organici; la concentrații mai mari, ozonul inactivează rapid o gamă largă de agenți patogeni (bacterii, inclusiv spori, viruși, protozoare).

Referindu-se în mod specific la eficacitatea împotriva SARS-CoV-2, având în vedere mecanismul de acțiune al ozonului, este posibilă o acțiune dezinfectantă. Cu toate acestea, în prezent, nu există demonstrații directe de eficiență obținute în studii controlate. Acesta este unul dintre primele studii care au arătat că are un efect de ozon. Într-adevăr, ozonul este un oxidant mai puternic decât alți dezinfectanți comuni, cum ar fi clorul și hipocloritul . Utilizarea clorului sau a hipocloritului în multe state a fost redusă din cauza formării produselor cancerogene ca trihalometani în timpul dezinfectării. În ceea ce privește bioctrarea, dezinfectarea cu ozon nu produce reziduuri dăunătoare și toate reziduurile de ozon vor fi transformate în oxigen într-un timp scurt . Ozonul este considerat un dezinfectant ecologic.

În plus, generatoarele de ozon sunt promovate în prezent ca fiind dispozitive pentru dezinfectarea mediilor de lucru și a camerelor de zi. Cu toate acestea, condițiile de funcționare trebuie selectate cu atenție, deoarece eficacitatea proceselor de ozonare variază semnificativ în funcție de caracteristicile mediului care urmează să fie dezigienizat 

În orice caz, înainte de utilizarea ozonului în locurile de tratare, este necesar să se valueze riscul de expunere ca și pentru operatorul implicat în operațiunea de dezinfectare, ca și pentru personalul care utilizează locul dezinfectat. Operatorii ar trebui să fie instruiți și să dispună de echipamente de protecție personală 
În concluzie, aici am arătat că ozonul ar putea inactiva SARS-CoV- 2 prezent în secrețiile din nazo- faringe, neutralizând ORF1ab, proteina E și genele proteice N și datele noastre susțin eficiența dezinfectarii cu ajutorul ozonului în mediile de lucru și în camerele de zi. Cu toate acestea, ozonul poate avea un efect asupra SARS-CoV- 2 de asemenea, in vivo și, prin urmare, vor fi necesare experimente suplimentare pentru a studia in vitro și in vivo efectul de ozon asupra COVID-19. În plus, deoarece concentrațiile de ozon la nivelul solului au atins un nivel maxim în timpul verii , este posibil ca ozonul să contribuie la nivelurile scăzute  a SARS-CoV- 2 care circulă în lunile mai calde.

Articolul original AICI